Sudah jadi rahasia umum banyak yang percaya bahwa lukisan Nyi Roro Kidul memiliki kekuatan mistis. Lukisan penguasa pantai selatan dengan balutan kebaya hijau itu bahkan digandakan dalam jumlah yang sangat banyak, dalam banyak variasi. Hingga kini, belum ada film yang mengangkat tentang lukisan tersebut secara khusus. Film Lukisan Ratu Kidul pertama kali yang mengangkat fenomena tentang lukisan yang terkenal gaib itu. Karena lukisan ini menyimpan sebuah jawaban.

Kisahnya tentang Dimas dan Satria Soedibyo justru memiliki banyak pertanyaan ketika ayah mereka meninggal. Terlalu banyak hal yang dirahasiakan oleh Brama Soedibyo kepada Dimas dan Satria. Bahwa kakek mereka; Rusdi Soedibyo adalah seorang pelukis yang terkenal di tahun 80-an, kematian sang Ibu yang tak pernah diceritakan, juga tentang sebuah rumah yang kini mendadak diwariskan kepada mereka. Juga tentang sebuah lukisan yang tersembunyi di rumah tersebut.